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  • 产品名称:Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B(50 mg/ml)

  • 产品型号:FS0012-20ML
  • 产品厂商:FuShen
  • 产品价格:1050
  • 折扣价格:0
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简单介绍:
Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B(50 mg/ml) 江苏弘麒生物科技有限公司为复申生物江苏分公司常规产品江苏现货供应 Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B(50 mg/ml)
详情介绍:

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B(50 mg/ml)


Hygromycin B 潮霉素B规格信息:

产品编号

产品名称

规格

价格(元)

FS0012-1G

Hygromycin B 潮霉素B(冻干粉)

1g 

600.00

FS0012-5G

Hygromycin B 潮霉素B(冻干粉)

5g 

2400.00

FS0012-10G

Hygromycin B 潮霉素B(冻干粉)

10g

3840.00

FS0012-10ML

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

10ml

680.00

FS0012-20ML

Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B50 mg/ml

20ml

1050.00

性状/储存

-20℃保存(干粉),4℃保存(液体)

Hygromycin B 潮霉素B生物应用: 

1)   筛选和维持培养稳定转染Hph+载体的原核细胞或真核细胞(植物细胞和哺乳动物细胞); 

2)   由于作用模式的差异,常与G418 (GeneticinTM)Zeocin blasticidin S联合使用,筛选稳定转染两个不同载体的细胞株;

双抗性稳定转染细胞筛选的***作用机制及抗性

***

抗性机制

抗性基因

哺乳动物筛选浓度

潮霉素B

干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读

Hph

200~500μg/mL

G418

干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成

Tn5/Tn601

100~1000μg/mL

Zeocin

掺入或者切割DNA引起细胞死亡

Sh ble

50~100μg/mL

blasticidin S

核糖体上抑制肽键形成

Bsd/BSD

3~50μg/mL

3抗病毒剂,由于潮霉素B选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,而且具有抑制翻译的功效;

4)作为驱虫药加入动物饲料; 

Hygromycin B 潮霉素B应用浓度: 

潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化。推荐使用浓度为50-1000 μg/mL*佳浓度需要杀灭曲线来确定。 

哺乳动物细胞·200-500 μg/mL;**/植物细胞·100-300 μg/mL;**·300-1000μg/mL 

Hygromycin B 潮霉素B产品使用:

使用一:杀灭曲线确定*佳杀死浓度(仅作参考,因个人检测体系而异)

1)往组织培养级的96孔板内加入未转染细胞,细胞密度约50-200细胞/;细胞贴壁之后,往每孔加入含不同浓度(如50-1000μg/mL,至少5个浓度)潮霉素B200μL新鲜培养基;

2375% CO2培养箱孵育细胞10-14天;

3)培养5-7天后更换新的培养液,培养液内含有相应浓度的潮霉素B

410-14天后使用细胞增殖方法如MTTCCK-8等评估细胞活力;也可以通过检测细胞克隆数或百分比汇合率来确定毒性效应。一般选择在10-14天能够杀死所有细胞的*小浓度为*佳筛选浓度。

使用二:筛选稳定转染细胞

(1)         对于贴壁细胞,直接吸去60mm培养皿内的转染细胞培养基,然后加入含有潮霉素B的新鲜培养基5-6ml;对于悬浮细胞,无菌条件250x g,离心10min除去旧的转染细胞培养基,然后悬浮在约5ml的含潮霉素B的新鲜培养基;

(2)         5-7天后,如上方法更换含有潮霉素B的新鲜培养基;

(3)         再孵育细胞5-7天;

(4)         10-14天孵育后,培养体系中只含有能够表达潮霉素B抗性表型的活细胞。因此筛选之后如步骤一,更换不含潮霉素B的新鲜培养基。 

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